自己做质粒自制慢病毒自己感染，主打的就是独立自主（我不说是因为老板不让买） 悬浮细胞采用CRISPER-Cas9技术构建慢病毒plasmid包病毒侵染的。 protocol在最后一张，改天我再出一个设计sg引物以及如何挑选的引物➕克隆sg质粒的protocol 这效果太好了吧🥹是我做过的敲除效果前top3。其实还有一点没敲除但完全足够可以去做实验了。 被KO这个蛋白才12kd，其实太小的蛋白和太大的蛋白都不好跑，转膜时间不要太久胶不要跑太下面就转膜，跑出来的条带就会好看很多，不然就很容易像小山丘…研究生日常 研究生 科研 科研日常 转膜条件：小蛋白90v 50min（不要转太久，不然容易转过了条带反而不好，其实小蛋白半小时就能转上，保险一点我会延长时间，理论上90v，1kd对应1min转膜时间就可以转上）